胃癌相关分子特征物的筛选

1.双相电泳与质谱联用对胃癌的肿瘤组织与癌旁组织、患者血清与正常对照血清，筛选差异表达蛋白。选取 10 例胃癌患者肿瘤组织以及远离肿瘤切端的正常胃黏膜组织，另取5 例低分化腺癌患者血清和 5 名健康志愿者血清，获得重复性和分辨率较好的胃代写医学职称论文组织和血清双向凝胶电泳图谱; 在胃癌组织和正常胃组织中发现 23个差异表达蛋白质，其中 15 个得到鉴定，分别在肿瘤组织中高表达的10 个蛋白质和低表达的5 个蛋白质。在胃癌患者血清和对照组血清的比较中，成功鉴定了 14 个差异表达蛋白质。通过免疫组织化学法检测胃癌组织差异蛋白质 CLU 的表达情况，发现胃癌肿瘤组织 CLU 的表达明显高于正常胃组织，并对此蛋白进行进一步研究。最后利用 Clinpro 磁珠亲和比较两组胃癌患者血清和正常对照血清蛋白谱的差异，通过生物信息学软件及统计方法建立胃癌诊断模型。血清甲基化 DNA通过 NimbleGen 启动子区域 CpG 岛芯片，对 9株胃癌细胞株和6 名正常胃黏膜组织的 DNA 进行代写医学职称论文多少钱启动子区域甲基化检测，甲基化芯片筛选出 82 个差异基因，其启动子区域在胃癌中高甲基化，正常胃黏膜中低甲基化或未发生甲基化。甲基化特异性 PCR( methy-lation specific P代写医学职称论文价格CR，MSP ) 检 测 候 选 基 因 BCAS4、CHRM2、FAM5C、PRAC 和 MYLK 在胃癌患者、胃癌癌前疾病患者和健康人血清中的甲基化。CHRM2、FAM5C 和 MYLK 的甲基化阳性率随病情进展呈正相关性。其中胃癌患者血清中 FAM5C 和 MYLK 在胃癌患者术后血清中的甲基化阳性率较术前有明显下降( P ＜ 0. 001) 。FAM5C 和 MYLK 联合检测的曲线下面积 ( area under the curve，AUC) 为 0代写代发医学职称论文. 838。FAM5C 和 MYLK 甲基化联合检测在胃癌患者和癌前疾病患者中的敏感性分别达到 77. 6% ( 45/58) 和30. 4% ( 14 /46 ) ，特 异 性 达 到 90% 。 FAM5C 和MYLK 联合甲基化检测阳性率术后为 24. 1% ( 14 /58) ，明显低于术前的 77. 6% ( 45 /58) ( P ＜ 0. 001) 。FAM5C 和 MYLK 联合甲基化检测与肿瘤大小( P ＜0. 001) 、肿瘤浸润深度 ( P = 0. 001 ) 和 TNM 分期( P =0. 003) 有相关性。

2.IPO-38 作为胃癌血清标志物为筛选胃癌患者血清标志物，我们使用抗体芯片技术发现 IPO-38 蛋白在胃癌患者血清中表达升高。选择了 94 例胃癌患者和 41 名正常对照人群的血清样本，采用 ELISA 法检测血清 IPO-38 抗原浓度，发现胃癌患者的血清 IPO-38 浓度为( 155. 097 ±45. 60) pg / mL，正常人血清 IPO-38 浓度为( 113. 154 ±26. 46) pg / mL，胃癌患者的血清 IPO-38 浓度高于正常对照人群，进一步分析发现 ROC AUC 为 0. 811，标准误为 0. 040。对比无效假设有明显的统计学差异( P ＜0. 001) 。由此认为 IPO-38 可以作为有一定诊断价值的血清学肿瘤标志物。使用 Youden's index确定的最佳临界值为 140. 399 pg/mL。此时，诊断灵敏度为57.4%，特异度为90.2%。诊断阳性标准的各血清指标水平分别为: IPO-38 ＞ 140.399 pg/mL，CEA ＞10. 00 ng / mL，CA72-4 ＞ 5. 3 U / mL，CA19-9 ＞ 37 U / mL。对比发现: IPO-38 的诊断敏感性高于其他常用的肿瘤标志物，IPO-38 为 57. 4%，CEA 为 7. 5%，CA72-4为 28. 4%，CA19-9 为 25. 4%。同时，通过 ROC 曲线对比 IPO-38 与其他常用肿瘤标志物的诊断准确性结果发现 IPO-38 的 AUC 为 0. 750，高于其他标志物，由此认为 IPO-38 具有更好的诊断准确性。

3.明确血清胃泌素是胃窦癌筛查的可用性指标收集30 名正常人和70 例胃癌的血清进行检测，发现胃窦癌患者的血清胃泌素水平显著低于对照人群( P ＜0. 05) ; 61. 4%的胃体癌患者的血清胃泌素水平低于对照人群。以正常人平均水平为界，高血清胃泌素水平的胃癌患者肿瘤体积明显小于低水平组，淋巴结转移个数也显著低于低水平组。胃癌患者血清 IL-33 的表达我们还运用 ELISA 法检测了 68 例胃癌患者和57 名健康人的血清样本，发现胃癌患者血清中 IL-33课题组的研究发现提示，干扰 BDKRB2 通路在靶向肿瘤血管治疗中具有潜在价值。

4. PTP1B 的生物学功能及其分子机制PTP1B 属于蛋白酪氨酸磷酸酶家族的一员，本研究发现，90%患者的胃癌组织中 PTP1B 高表达，并且 PTP1B 在胃癌组织中的表达强弱与 TNM 分期有明显的相关性; 下调 PTP1B 的表达明显抑制胃癌细胞的增殖、生长、克隆形成、黏附、迁移、侵袭及裸鼠体内的成瘤。